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qPCR實驗：0.1 ml PCR 12聯(lián)管配熒光定量光學(xué)平蓋
這是一種專為實時熒光定量PCR(qPCR)實驗設(shè)計的關(guān)鍵耗材，其核心目的是在qPCR儀中進行熒光信號采集時，實現(xiàn)高通量、低成本且可靠的檢測。
以下是詳細的介紹：
一、是什么?
這是一種通常由高透光的聚丙烯(PP)或聚酯薄膜制成的薄片狀蓋膜。它的一面涂有特殊的光學(xué)透明膠，另一面是超平滑的光學(xué)表面。
匹配性：它專為12聯(lián)管(也稱為12排管) 設(shè)計，尺寸匹配標(biāo)準(zhǔn)96孔板規(guī)格(SBS標(biāo)準(zhǔn))的12聯(lián)管架子。
功能：通過壓敏膠，將其緊密地粘貼在12聯(lián)管的管口上，形成一個光學(xué)平整的密封表面，并防止PCR過程中試劑的蒸發(fā)和交叉污染。
二、主要特點與優(yōu)勢
優(yōu)異的光學(xué)透性：
蓋膜具有的透光率，特別是在qPCR常用的熒光波長范圍內(nèi)(如FAM, VIC, ROX, Cy5等)，確保熒光信號能被儀器光學(xué)檢測系統(tǒng)準(zhǔn)確、高效地捕獲，保證數(shù)據(jù)的精確性。
光學(xué)平整表面：
“平蓋"意味著其表面非常平整。這在qPCR中至關(guān)重要，因為儀器的光學(xué)鏡頭在掃描時，其焦距是固定的。一個平整的蓋膜表面確保了每個孔到鏡頭的距離一致，避免了因高度差導(dǎo)致的信號聚焦不準(zhǔn)和信號衰減，從而保證了孔間數(shù)據(jù)的可比性和重復(fù)性。
密封防蒸發(fā)：
背面的壓敏膠能形成牢固的密封，有效防止PCR過程中高溫導(dǎo)致的水分蒸發(fā)。試劑蒸發(fā)會顯著改變反應(yīng)體系的濃度，導(dǎo)致實驗失敗(如Ct值不準(zhǔn)、反應(yīng)效率低下等)。
高通量與低成本：
這是其相對于單個硬質(zhì)穹頂蓋。使用硬質(zhì)蓋帽需要逐個手動或使用壓蓋器扣蓋，非常耗時耗力。而光學(xué)平蓋可以一次性密封整排12個或整個96孔板，極大地提高了工作效率，特別適合大批量樣本檢測。
成本通常遠低于購買96個獨立的硬質(zhì)蓋帽。
防交叉污染：
良好的密封性也避免了氣溶膠的溢出，防止了孔與孔之間的交叉污染。
三、適用場景
高通量熒光定量PCR實驗：如基因表達分析(RT-qPCR)、病原體檢測、SNP分型等所有需要用到96孔板格式qPCR的實驗。
使用標(biāo)準(zhǔn)12聯(lián)管(0.1 ml)和96孔板支架的各類qPCR儀，例如：
Applied Biosystems (ABI) 7500/7500 Fast, StepOnePlus, ViiA 7
QuantStudio 3/5/6/7 Pro
Bio-Rad CFX96, CFX Opus系列
Roche LightCycler 480
Eppendorf Mastercycler ep realplex
以及其他兼容96孔板的qPCR儀。
四、如何使用?
準(zhǔn)備：將反應(yīng)體系加入0.1 ml的12聯(lián)管中，并將聯(lián)管放入對應(yīng)的96孔板架子上。
撕?。簭谋Ｗo底紙上取下一張光學(xué)平蓋(通常為8聯(lián)排或12聯(lián)排的預(yù)切割蓋膜)。
覆蓋：將蓋膜有膠的一面朝下，仔細對齊管架的上緣，輕輕放下。
壓緊：使用提供的壓板工具或?qū)嶒炇页Ｓ玫钠桨骞伟?，用力、均勻地刮壓蓋膜表面，確保每個管口都與蓋膜密封，沒有氣泡和褶皺。
檢測：將密封好的整個板架放入qPCR儀中進行擴增和熒光采集。
| V20122-C | 0.2ml PCR十二聯(lián)管 | 透明 | 120排/盒, 10盒/箱 |
| V20122-M | 0.2ml PCR十二聯(lián)管 | 乳白色 | 120排/盒, 10盒/箱 |
| V10122-C | 0.1ml PCR十二聯(lián)管 | 透明 | 120排/盒, 10盒/箱 |
| V10122-M | 0.1ml PCR十二聯(lián)管 | 乳白色 | 120排/盒, 10盒/箱 |
| V21112-C | 熒光定量PCR十二聯(lián)管光學(xué)平蓋 | 透明 | 120排/包, 10包/盒 |
五、選擇注意事項
兼容性：務(wù)必確認光學(xué)平蓋與您實驗室的qPCR儀型號兼容。不同儀器的光學(xué)系統(tǒng)設(shè)計可能對蓋子的透光率和厚度有特定要求。
粘合劑：優(yōu)質(zhì)的粘合劑應(yīng)能在PCR熱循環(huán)的高溫(通常最高105°C)下保持粘性，不會熔化、溢出或殘留難以清理的膠漬。
無核酸酶/無酶：確保產(chǎn)品經(jīng)過認證，無核酸酶和無DNA/RNA酶污染，這對于敏感的qPCR實驗至關(guān)重要。
無熒光干擾：蓋膜自身不應(yīng)產(chǎn)生自發(fā)熒光，以免干擾熒光信號的采集，造成背景值過高。
注：以上資料僅供參考，不作為實際數(shù)據(jù)，如需具體產(chǎn)品資料請咨詢技術(shù)老師或品牌商。
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