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如何選擇ELISA試劑盒?關(guān)鍵檢測方法解析
選擇ELISA試劑盒需首先明確檢測目標(biāo)(大分子蛋白或小分子抗原)及樣本類型，再根據(jù)檢測原理匹配方法：
1. ?雙抗體夾心法?
適用于二價及以上大分子抗原(如細(xì)胞因子、抗體)，通過捕獲抗體和檢測抗體形成“夾心"結(jié)構(gòu)，特異性高且靈敏度強?。但需確?？乖鄠€表位，且需優(yōu)化抗體對以避免交叉反應(yīng)?。
2. ?競爭法?
針對小分子抗原，通過待測物與酶標(biāo)抗原/抗體競爭結(jié)合位點，顯色信號與待測物濃度成反比?。優(yōu)勢在于可檢測不純樣本，但敏感性和專一性較低?。
3. ?間接法?
通過酶標(biāo)二抗放大信號，靈敏度高且經(jīng)濟(jì)靈活，常用于抗體效價檢測?。但需注意二抗可能與非目標(biāo)蛋白結(jié)合導(dǎo)致背景升高?。
4. ?直接法?
步驟簡單，適合快速檢測，但靈敏度低且需標(biāo)記每種一抗，成本較高?。
選擇建議
大分子蛋白?：優(yōu)先雙抗體夾心法?;
小分子抗原?：選擇競爭法?;
樣本復(fù)雜度?：高背景樣本需優(yōu)化封閉和洗滌步驟?;
靈敏度要求?：低豐度目標(biāo)需高敏試劑盒(pg/mL級)?。
注意事項
驗證試劑盒的批間精密度(CV<15%)和加標(biāo)回收率(80%~120%);
特殊樣本(如高脂血清)需預(yù)處理或選擇適配試劑盒?。
注：以上僅供參考，不作為實際數(shù)據(jù)，實驗需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。
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