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大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒的實驗使用說明書如下：
1. 試劑盒組成
?酶標(biāo)包被板?：1×48或1×96孔，2-8℃保存?。
?標(biāo)準(zhǔn)品?：濃度為2700ng/L，0.5ml×1瓶，2-8℃保存?。
?標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液?：1.5ml×1瓶?。
?酶標(biāo)試劑?：3ml×1瓶(48孔配置)或6ml×1瓶(96孔配置)?。
?顯色劑A液和B液?：各3ml×1瓶(48孔配置)或6ml×1瓶(96孔配置)?。
?樣品稀釋液?：3ml×1瓶(48孔配置)或6ml×1瓶(96孔配置)?。
?封板膜?：2片?。
?說明書?：1份?。
2. 實驗步驟
?試劑準(zhǔn)備?：將試劑盒從冰箱中取出，室溫平衡20-30分鐘?。
?標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制?：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線?。
?樣品處理?：血清、血漿、組織勻漿等樣品需離心去除沉淀，分裝后冷凍保存，避免反復(fù)凍融?。
?加樣?：依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，溫育并洗滌?。
?顯色?：加入底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化為黃色?。
?讀數(shù)?：使用酶標(biāo)儀讀取OD值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品濃度?。
3. 注意事項
?實驗誤差控制?：建議所有標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照做雙份檢測，取平均值?。
?顯色控制?：若顯色過淺，可適當(dāng)延長底物溫育時間?。
?樣品保存?：樣品宜在新鮮時檢測，避免細(xì)菌污染?。
?試劑保存?：開封后未用完的酶標(biāo)包被板應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存?。
4. 實驗器材
?標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀?：用于讀取OD值?。
?自動洗板機(jī)?：用于洗滌微孔板?。
?37℃恒溫箱?：用于溫育反應(yīng)?。
?移液器及吸頭?：建議使用多通道移液器以提高效率?。
?洗滌液?：使用中性PBS或TBS?。
以上內(nèi)容綜合了多個來源的實驗使用說明，確保實驗的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性?。
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