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以下是關(guān)于大鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明：
1. ?試劑盒組成?
標(biāo)記物?：HRP標(biāo)記物?。
樣本類(lèi)型?：適用于大鼠血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等?。
檢測(cè)方法?：雙抗體夾心法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法以及BAS-ELISA等?。
2. ?樣本處理?
血清?：使用無(wú)菌管收集，室溫血液自然凝固10-20分鐘，2-8℃條件下離心20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分)，仔細(xì)收集上清?。
血漿?：選擇EDTA、肝素鈉或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，2-8℃條件下離心20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分)，收集上清?。
細(xì)胞上清液?：2-8℃條件下離心20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分)，收集上清?。
組織勻漿?：稱(chēng)取1g組織，加入9g PBS(pH 7.2-7.4)，勻漿后離心20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分)，收集上清?。
3. ?實(shí)驗(yàn)步驟?
加樣?：在各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品各100μL，37℃孵育90分鐘?。
加入生物素化抗體?：加入100μL生物素化抗體工作液，37℃孵育60分鐘?。
洗滌?：洗滌3次?。
加入酶結(jié)合物?：加入100μL酶結(jié)合物工作液，37℃孵育30分鐘?。
洗滌?：洗滌5次?。
加入底物?：加入90μL底物溶液，37℃孵育15分鐘左右?。
終止反應(yīng)?：加入50μL終止液，立即在450nm波長(zhǎng)處測(cè)量OD值?。
結(jié)果計(jì)算?：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣本中PAL的濃度?。
4. ?注意事項(xiàng)?
樣本保存?：如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分保存?。
試劑保存?：試劑盒應(yīng)按照說(shuō)明書(shū)要求保存，避免反復(fù)凍融?。
實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)定?：正式測(cè)定之前，建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定?。
5. ?應(yīng)用?
用途?：本試劑盒主要用于科研實(shí)驗(yàn)和課題研究，定量檢測(cè)大鼠血清中的PAL濃度?。
以上內(nèi)容綜合了多個(gè)來(lái)源的實(shí)驗(yàn)步驟和注意事項(xiàng)，確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性?。
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