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大鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒實驗使用說明書
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  大鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒實驗使用說明書

  BS-2969  大鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒

  以下是天津本生關(guān)于大鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合指南:

  一、實驗原理

  采用雙抗體夾心ELISA法,通過預(yù)包被抗體捕獲樣本中的IL-3,再與生物素標記的檢測抗體及HRP標記的親和素形成復(fù)合物,TMB顯色后測定OD值,濃度與吸光度成正比。

  二、試劑盒組成

  預(yù)包被96孔板

  凍干標準品(需用1ml蒸餾水復(fù)溶)

  生物素標記抗體(100×濃縮)

  HRP標記親和素(100×濃縮)

  洗滌緩沖液(25×濃縮)

  TMB顯色液及終止液

  三、樣本處理

  血清/血漿?:采集后1000×g離心10分鐘,避免溶血或脂血

  組織勻漿?:用生理鹽水勻漿后離心取上清

  保存?:短期存于2-8℃(48小時內(nèi)),長期需分裝凍存于-70℃,避免反復(fù)凍融

  四、實驗步驟

  標準品稀釋?:按說明書梯度稀釋(示例:4000→2000→1000 pg/mL等比稀釋)

  加樣?:每孔加入100μL標準品或樣本,37℃孵育120分鐘

  洗滌?:用1×洗滌液洗板4-6次,拍干

  加檢測抗體?:加入生物素化抗體工作液,37℃孵育60分鐘

  加酶結(jié)合物?:加入HRP標記親和素,37℃孵育30分鐘

  顯色?:加入TMB避光顯色15分鐘,終止后450nm讀數(shù)

  五、注意事項

  不同批次試劑不可混用,使用前所有組分需平衡至室溫

  顯色時間需嚴格控制,終止后10分鐘內(nèi)完成讀數(shù)

  避免底物接觸金屬器械,操作時需佩戴防護裝備

  若樣本濃度超出范圍,需用稀釋液適當稀釋后重測

  六、數(shù)據(jù)計算

  以標準品濃度為橫坐標,OD值為縱坐標繪制標準曲線,通過擬合方程計算樣本濃度。

  注:以上資料僅供參考,如需更詳細參數(shù)(如檢測范圍、靈敏度等),建議查閱試劑盒配套說明書或聯(lián)系供應(yīng)商獲取。

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